クライオテクニックレクチャー

蛋白質結晶の凍結に関する技を皆様がレクチャー 関連?:Dehydrationとクライオと常温についてhttp://togetter.com/li/134882
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Crystalove @cyanolipid

ようやく液体窒素くみ!結晶拾うぞっっっ\(^o^)/

2012-11-01 19:28:20
Crystalove @cyanolipid

液体窒素くみばが、銀杏だらけ。ここを中心に半径5メートル黄色い。 タンク2つのせたガラガラのタイヤが、プチプチと実を潰している音がする。どうにもさけられない。

2012-11-01 19:36:00
Crystalove @cyanolipid

結晶が薄くて多結晶でクライオにしようとするとたわむし割れるしどんどん破壊されていって涙がでそう

2012-11-02 01:13:17
ひ○たく @kun32xu

@cyanolipid 落ち着いてハンドリングテクを磨こう。その結晶を思うように拾えるようになったらきっとどんなものにも対応できる。目の前にあるものにベストを!支援。

2012-11-02 01:18:28
Naoki Sakai @nsakaii

@kun32xu @cyanolipid まず絶対に焦ってはいけない。どんなに結晶拾うのが上手い奴でも最初はみんな下手くそだ。サンプルが貴重ならばリゾチームの結晶でいいから練習するんだ。コレばっかりは経験とちょっとのコツだから。繰り返すが決して焦ってはいけない。

2012-11-02 01:44:01
ひ○たく @kun32xu

@nsakaii @cyanolipid ドロップのどこからループにのった結晶をヒッコ抜くか、表面張力と結晶がループ上に居る力のバランスをどう保つか、を探すのが良いのかな。ものに依るかもやがパスツールとかですくいやすい環境にうつすのも手かもしれん。パスツールテクも鍛錬が必要だが。

2012-11-02 01:50:14
ひ○たく @kun32xu

@nsakaii @cyanolipid テクいインド人がハンギングの液滴底に出来る結晶をカバーガラスを裏返さずにすくうことで劇的に良くなったのも聞いたことがある。これは変態技術ですが。どこにできやすいかってのにも依存するですね。

2012-11-02 01:52:20
ima3 @timasaki

@cyanolipid @nsakaii @kun32xu プロテクタントを入れるだけでその状態になるのであれば、やはり少しずつプロテクタント濃度を上げていくしかないかと。最初は結晶化ドロップに5%くらい足したもの加えて、一晩くらい寝かすと馴染んで次のステップへの耐性がつく場合が

2012-11-02 01:53:50
Naoki Sakai @nsakaii

@timasaki @cyanolipid @kun32xu クライオ処理についてはこの前の千田ねえさんの発表にあったようにクライオ処理の時間とか温度も検討の対象になるとおもう。ハンドリングについてはループの大きさでも拾い易さが変わるから試してみては。

2012-11-02 01:57:42
ima3 @timasaki

@kun32xu インド人って器用な人多いんですか? (素朴な疑問

2012-11-02 01:57:45
ima3 @timasaki

@nsakaii 千田さんのアプローチはただただ感心

2012-11-02 01:58:27
Naoki Sakai @nsakaii

@timasaki @kun32xu アレだけ人口が多いので特殊能力を発揮できる人がそこそこいるんじゃないかな。

2012-11-02 01:58:31
Naoki Sakai @nsakaii

@timasaki 最近、参考にして低温室でクライオ処理してみている。寒いけど…

2012-11-02 01:59:15
ima3 @timasaki

@nsakaii 私はそれ昔やったことあるのですがあまり効果ありませんでした

2012-11-02 02:00:38
ima3 @timasaki

@nsakaii なのでプロテクタントカクテルをば

2012-11-02 02:00:57
Naoki Sakai @nsakaii

@timasaki まだ結果見てないのに…カクテルは学生にやらせて見てる。来月のSLSでの測定に持っていきます。楽しみ!

2012-11-02 02:02:19
ima3 @timasaki

@nsakaii 低温は効く奴は効くようです。case by caseなので私の結果は参考にしないで良いかとw。クロマチンリモデリングやってる人はこれが必須だと言ってました。論文にも書いてあるので興味あれば紹介します

2012-11-02 02:04:49
Naoki Sakai @nsakaii

@timasaki 僕も効果があった話は何人かから聞いたことがあるので改めて試し中。論文教えて。勉強します。

2012-11-02 02:06:04
ima3 @timasaki

@nsakaii これっす。http://t.co/SuApWDOI ちなみに彼らは -20度で凍らせてます( ꒪Д꒪)。そういう部屋があるらしい

2012-11-02 02:06:52
Naoki Sakai @nsakaii

@timasaki さんくす。えらい改善されてるねw しかし-20℃部屋って…

2012-11-02 02:19:55
Crystalove @cyanolipid

@nsakaii @timasaki @kun32xu ううぅ(ToT)ほんとにありがとございますっ。急がばまわれっ。やはりいろんなクライオ溶液に浸して一晩様子見て…を繰り返して何をどこまであげれるのか地道に検討せねばですね。今日は焦らず結晶と語り合って来ますっm(__)m

2012-11-02 08:27:53
Crystalove @cyanolipid

@nsakaii @kun32xu ハンドリングテクニックは、みんな20℃くらいで磨くのですかね...リゾチームなら常温で何とかなりそうですね!焦っちゃダメですね_Φo(´Д`;)メモメモ 結果が欲しすぎて気持ちはすごく焦るのですが、結晶の前では落ち着けるよう努力します。

2012-11-02 09:01:16