-
- いいね！1
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
【PCR初心者必見！ プライマーの設計で守るべき10のオキテ】 年明け早々ツイートするネタが無いので、なかのひとがプライマーの設計の「コツ」を伝授！このオキテをしっかり守ればあなたもPCRマスターに！？ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:34:45
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
二、融解温度 (Tm値) は55〜65℃、プライマー同士の温度差を5℃以内にすべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:36:01
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
三、プライマーのTm値が低い場合は、よりGC含有量が多い配列を探す、あるいはプライマーの長さを少し伸ばすべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:36:51
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
四、GC含有率は40〜60%とし、結合を促進するため3'末端はCまたはGにすべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:45:20
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
五、効率よく切断するために、プライマーの制限酵素部位の5'末端に3〜4塩基付加すべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:46:10
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
六、プライマー内部の二次構造形成を避け、GCリッチ領域とATリッチ領域の分布のバランスがとれているようにすべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:47:48
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
七、4塩基以上の連続した同一塩基配列や繰り返し配列を避けるべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:49:11
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
八、プライマー内部での3塩基以上の相補的配列や、プライマー間(フォワードプライマーとリバースプライマー間)での相補的配列を避けるべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:50:47
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
九、クローニングに用いるプライマーの場合は、最低でもカートリッジ精製以上のグレードを使うべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:51:34
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
十、変異導入に用いるプライマーの場合は、プライマーの中央部にミスマッチの塩基が来るようにすべし！ #プライマー設計のオキテ
2014-01-07 14:52:01
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
@cytometrer ホントはオネエ言葉でやろうと思ったのですが、怒られそうなのでやめました…。
2014-01-07 14:53:32
サーモフィッシャーサイエンティフィック
@ThermoFisherJP
これだけキッチリ設計しても増えなかったり、テキトーに設計しても増えたりするのがPCRだったりするのですけどね…。 #アニールはいつも55℃派
2014-01-07 15:01:22